domingo, 6 de mayo de 2012

6.2.1 ETAPAS DE SÍNTESIS DEL ARN.


INICIACIÓN

Primero, una Helicasa separa las hebras de ADN en estas denominadas cajas TATA, ya que entre adenina y timina se establecen dos enlaces de hidrógeno, mientras que entre citosina y guanina se forman tres. Posteriormente se unen los factores y las proteínas de transcripción (TBP, TF2D, TF2B) permitiendo, de esta manera, el acceso de la ARN polimerasa al molde de ADN de cadena simple, siendo esta la ultima en posicionarse. Aunque la búsqueda del promotor por la ARN polimerasa es muy rápida, la formación de la burbuja de transcripción o apertura del ADN y la síntesis del cebador es muy lenta. La burbuja de transcripción es una apertura de ADN desnaturalizado de 18 pares de bases, donde empieza a sintetizarse el ARN cebador a partir del nucleótido número 10 del ADN molde de la burbuja de transcripción. La burbuja de transcripción se llama complejo abierto. La ARN polimerasa es una enzima formada por 5 subunidades: 2 subunidades α, 1 subunidad β, 1 subunidad β' y 1 subunidad ω que tiene como función la unión de ribo nucleótidos trifosfato. Cuando se forma el complejo abierto, la ARN polimerasa comienza a unir ribo nucleótidos mediante enlaces fosfodiéster, y una vez que se forma el primer enlace fosfodiéster, acaba la etapa de iniciación. Y comienza así la siguiente etapa.


ELONGACIÓN

La ARN polimerasa cataliza la elongación de cadena del ARN. Una cadena de ARN se une por apareamiento de bases a la cadena de ADN, y para que se formen correctamente los enlaces de hidrógeno que determina el siguiente nucleótido del molde de ADN, el centro activo de la ARN polimerasa reconoce a los ribo nucleótidos trifosfato entrantes. Cuando el nucleótido entrante forma los enlaces de hidrógeno idóneos, entonces la ARN polimerasa cataliza la formación del enlace fosfodiéster que corresponde. A esto se le llama elongación, la segunda etapa de la transcripción del ARN.


TERMINACIÓN

Al finalizar la síntesis de ARNm, esta molécula ya se ha separado completamente del ADN (que recupera su forma original) y también de la ARN polimerasa, terminando la transcripción. La terminación es otra etapa distinta de la transcripción, porque justo cuando el complejo de transcripción se ha ensamblado activamente debe desensamblarse una vez que la elongación se ha completado. La terminación está señalizada por la información contenida en sitios de la secuencia del ADN que se está transcribiendo, por lo que la ARN polimerasa se detiene al transcribir algunas secuencias especiales del ADN. Estas secuencias son ricas en guanina y citosina, situadas en el extremo de los genes, seguidas de secuencias ricas en timina, formando secuencias palindrómicas, que cuando se transcriben el ARN recién sintetizado adopta una estructura en horquilla que desestabiliza el complejo ARN-ADN, obligando a separarse de la ARN polimerasa, re naturalizándose la burbuja de transcripción. Algunas secuencias de ADN carecen de la secuencia de terminación, sino que poseen otra secuencia a la que se unen una serie de proteínas reguladoras específicas de la terminación de la transcripción como rho.


























BIBLIOGRAFIA


6.2 ORGANISMOS EUCARIÓTICOS


La estructura de los ARNm y el proceso de transcripción en las células eucariotas, es similar a lo expresado anteriormente para las células procariotas. Sin embargo, debemos considerar las siguientes diferencias:
a) Las células eucariotas poseen tres clases de ARN polimerasas (I, II y III), las cuales se utilizan para sintetizar los distintos tipos de ARN existentes.
b) Los extremos 3’ y 5´ de los ARNm están modificados. En el caso del extremo 5’ encontraremos una estructura denominada  CAP y, en el correspondiente extremo 3’, se encuentra adherido una larga secuencia de nucleótidos cuya base nitrogenada es la Adenina (Cola Poly A).
c) Las moléculas de ARNm, luego de ser sintetizas, son modificadas. Los “transcriptos primarios” eucariotas sufren un proceso por el cual determinadas secuencias  (Intrones) son eliminadas.
d) Los ARNm eucariotas son Monocistrónicos.



Las ARN polimerasas eucariotas:
Ya se ha mencionado que, en las células del tipo Eucariota, encontramos tres tipos de ARN polimerasa las cuales se denominan: ARN polimerasa I, ARN polimerasa II  y ARN polimerasa III. Sus composiciones en sub unidades son complejas y aun no se conoce en exactitud la función de cada una de estas sub unidades. Lo que sí se conoce con exactitud, es la localización y el producto de cada una de ellas. 


ENZIMA                       Localización                        Producto
ARN Polimerasa I     Nucleólo                               Pre- ARNr
ARN Polimerasa II    Nucleoplasma                     Pre-ARNm
ARN Polimerasa III   Nucleoplasma                     Pre- ARN t y ARNr 5S



El Promotor Eucariota para la ARN Polimerasa II
Los promotores de la ARN Polimerasa II muestran una mayor variación en secuencia y la enzima es incapaz de iniciar la transcripción sola, sino que requiere de una serie de factores de transcripción, los cuales son los encargados del reconocimiento de un promotor particular. Recordemos que, en las células Procariotas, el factor sigma es el que le confiere a la ARN Polimerasa la capacidad de seleccionar a cada uno de los promotores. En Eucariotas, al igual que en los Procariotas, las homologías en las regiones próximas al punto de inicio están restringidas a  secuencias relativamente cortas. La mayoría de los promotores tienen una secuencia denominada  TATA box o Caja Hogness, centrada a –25 Pb del punto de inicio. Esta  TATA box es idéntica a lamencionada en la Transcripción de las células Procariotas, variando solamente en su localización.


Los EXALTADORES o ENHACERS
Los promotores Eucariotas no trabajan solos para asegurar una transcripción eficaz. En algunos genes o tipos celulares, la actividad de un promotor está aumentada por la presencia de otra secuencia conocida como Exaltador o Enhacer.
Las características de los Exaltadores son las siguientes:
• Están formados por cientos de bases
• Generalmente incluyen secuencias repetidas
• Actúan a distancia, miles de bases del promotor.
• Son activos en cualquier orientación respecto al  promotor, incluso suele encontrárselos dentro del mismo gen.
Los exaltadores, entonces, actúan como reguladores de la expresión  génica.
No está claro aún el mecanismo de acción de los exaltadores, más aún cuando estos se encuentran localizados a cualquier distancia (1000  a 2000 Pb) y dirección del mencionado promotor.



El ARN mensajero en Eucariotas:
Si bien la síntesis y estructura de los ARN mensajeros en Eucariotas es similar a las Procariotas, deben mencionarse las siguientes diferencias:
a) Ambos extremos están modificados, el 5’ presenta una estructura denominada CAP (caperuza) y el 3’ contiene una secuencia de Ácido Poliadenílico denominada Cola Poly A.
b) La molécula que sirve de molde para la síntesis de  proteína (ARNm maduro) es  más corta que el ARN mensajero recién sintetizado (Pre – ARN mensajero). Esto se debe a que los últimos sufren un proceso de eliminación de secuencias no codificantes. Dicho proceso se denomina Splicing.


BIBLIOGRAFIA



6.1.1 ETAPAS DE SÍNTESIS DEL ARN.


1° etapa-   UNIÓN de la ARN polimerasa al ADN
2° etapa-   INICIACIÓN de la síntesis 
3° etapa-   ELONGACIÓN de la cadena de ARN mensajero
4° etapa-    TERMINACIÓN de la síntesis y liberación de la cadena de ARNm

1° ETAPA-   UNIÓN DE LA ARN POLIMERASA AL ADN
Se mencionó anteriormente que la ARN polimerasa se  unía a un sitio específico del ADN denominado Promotor. La enzima es capaz de reconocer este sitio del ADN y, convenientemente, abrir localmente las cadenas de ADN para poder leer la cadena molde. Es de esperarse entonces que, el sitio de contacto con la Holo enzima tuviese regiones comunes a todos los Promotores. Se ha comprobado que estos sitios mencionados contienen secuencias de bases comunes, a las que se las ha denominado “Secuencias de Consenso”. Por mera convención entre los científicos, se considera que el sentido de la transcripción de un gen determinado es hacia la derecha. Al punto en el cual se inicia este proceso se lo denomina  “punto 0”. Con números negativos se señalan las bases ubicadas a la izquierda del punto 0. Con el mismo criterio, se señalan con números positivos a las bases ubicadas a la derecha del punto 0.La secuencia de consenso más importante y mejor estudiado, comprende seis bases y su centro está ubicado a diez bases a la izquierda del punto de inicio (-10). La secuencia de consenso es TATAAT y se la denomina  “TATA box o Caja Pribnox”. Esta caja es responsable de orientar a la ARN polimerasa en la dirección de síntesis de ARN y es la región en la cual la doble hélice se abre para formar el Complejo Promotor Abierto. El hecho de que la TATA box contenga las bases A-T no es mera casualidad, ya que estas se unen con sus complementarias por medio de dos enlaces del tipo Puente de Hidrógeno, lo cual implica un menor gasto de energía para la apertura del ADN.


2° ETAPA-   INICIACIÓN DE LA SÍNTESIS 
La iniciación se produce mediante la unión de la ARN polimerasa (Holo enzima) al ADN de doble cadena. Para que la cadena molde esté disponible para el apareamiento  de bases con los ribo nucleótidos, las dos cadenas de ADN deben separarse. El desenrollamiento es local y se produce cuando la Holo enzima contacta con la TATA Box.
Una vez que el complejo promotor se encuentra abierto, la ARN pol. Comienza la síntesis. La fase de iniciación no se completa hasta que se hallan polimerizado los primeros seis ribo nucleótidos. 


3° ETAPA-   ELONGACIÓN DE LA CADENA DE ARN MENSAJERO

Después que se han colocado los primeros seis ribo nucleótidos, la ARN polimerasa sufre un cambio en su conformación, perdiendo la sub unidad σ. Se continúa la síntesis en el estado de Core anteriormente descrito. El Core se mueve a lo largo del ADN colocando los ribo nucleótidos complementarios a la cadena de ADN molde, abriendo la hélice a medida que se desplaza. Los ribo nucleótidos se unen al extremo 3’ de la cadena de ARN en crecimiento, formándose un  Híbrido ARN-ADN en la región desenrollada, el cual se mantiene estabilizado mediante enlaces puente de Hidrógeno. El híbrido tiene una longitud aproximada de 12 pb y el nuevo ARN es liberado de estas uniones cuando el ADN recupera su estado de doble hélice por desplazamiento del Core.


4° ETAPA-    TERMINACIÓN DE LA SÍNTESIS Y LIBERACIÓN DE LA CADENA DE ARNm
La terminación ocurre en una secuencia determinada del ADN, denominada Secuencia Terminadora. En este punto, la enzima deja de añadir los ribo nucleótidos a la cadena de ARN en crecimiento, liberando el producto terminado y disociándose del ADN.
La terminación requiere que todos los enlaces Puente de Hidrógeno, que mantenían al Híbrido ARN – ADN, se rompan volviéndose a reconstituir el ADN dúplex.
Las secuencias terminadoras muestran las siguientes similitudes:
i) Todas contienen secuencias  Palindrómicas  justo antes del punto de terminación. El palíndromo está caracterizado por poseer repeticiones inversas conteniendo un segmento central no repetido  (ej. ATCATCGACTA).
ii) La secuencia palindrómica continúa con una secuencia de pares A-T, las cuales producen en el ARN mensajero una secuencia de 6 a 8 Uracilos en el extremo transcrito.






BIBLIOGRAFIA



6.1 ORGANISMOS PROCARIÓTICOS



La expresión génica se concretiza por la transformación de la información genética desde moléculas de ADN a moléculas de ARN y desde estas hasta los poli péptidos correspondientes.  Las moléculas de ARN son sintetizadas usando como molde a segmentos específicos de ADN, en la reacción de polimerización que es catalizada por la enzima conocida como ARN polimerasa.














A) Los precursores en la síntesis de ARN (unidades estructurales) son cuatro ribo nucleótidos trifosfatados: rATP; rCTP; rGTP; rUTP.
B) La secuencia de bases, del ARN a polimerizar, esta  determinada por medio de la secuencia de bases de la molécula de ADN utilizada como molde para su síntesis. He ahí que se la denomine Cadena Molde de ADN.
C) La cadena de ARN crece en dirección 5’ – 3’. Esta dirección coincide con la síntesis de ADN.
D) La ARN polimerasa, a diferencia de la ADN polimerasa, es capaz de iniciar su síntesis sin la presencia de ningún tipo de molécula cebadora.


ETAPAS EN  LA SÍNTESIS DEL ARN MENSAJERO

Con la finalidad de ordenar el estudio de la transcripción, dividiremos la misma en cuatro etapas fundamentales:
1° etapa-   UNIÓN de la ARN polimerasa al ADN
2° etapa-   INICIACIÓN de la síntesis 
3° etapa-   ELONGACIÓN de la cadena de ARN mensajero
4° etapa-    TERMINACIÓN de la síntesis y liberación de la cadena de ARNm

CARACTERÍSTICAS DE LA ARN POLIMERASA PROCARIONTE

La ARN polimerasa es una de las enzimas más grandes que se conoce. Consta de cinco sub-unidades: dos alfa (α), beta (β), beta prima (β’) y sigma (σ). La enzima completa es denominada Holo enzima y se divide en dos componentes principales:
• La enzima central, denominada Core, formada por las sub unidades 2α, β y  β’
• El  Factor Sigma  (el poli péptido σ).
 

Los nombres indican que solamente la Holo enzima tiene la capacidad de unirse a la cadena molde de ADN e iniciar la transcripción; pero una vez realizada esta, el factor σ es liberado, dejando que el Core continúe con la elongación.  En definitiva, es el factor σ el que le da la capacidad a la ARN polimerasa para poder iniciar la síntesis del ARN mensajero en el sitio apropiado.
La Holo enzima reconoce un sitio de unión específico en el ADN, este sitio es denominado Promotor.  Como consecuencia de lo dicho, la ADN polimerasa puede encontrarse en dos estados:
1) Un estado apropiado para la unión con el Promotor: “estado de iniciación” u Holo enzima.
2) Un estado apropiado para la elongación: Core de la enzima

La unión de la Holo enzima con el promotor, determina el  Complejo Promotor Abierto, y esto es posible gracias a la presencia del factor σ.
La ARN polimerasa es lo bastante grande como para tomar contacto con muchas bases del ADN, así la enzima cubre aproximadamente unas 60 pb (pares de bases), aunque el segmento de ADN desenrollado, y que sirve como molde, comprende únicamente unos 17 pb.


BIBLIOGRAFIA

UNIDAD 6


SEP                           SNEST                      DGEST

“INSTITUTO TECNOLOGICO
DE CIUDAD ALTAMIRANO”


 
PRESENTA: MARTIN HERRERA JUAREZ
UNIDAD: “6”
“TRANSCRIPCIÓN GENÉTICA”
No DE CONTROL: 09930312
CARRERA: LIC. EN BIOLOGIA
VI SEMESTRE

Ciudad Altamirano gro. México a 6 de mayo del 2012





TEMARIO
UNIDAD
TEMAS
SUBTEMAS
6
Transcripción genética
6.1 Organismos procarióticos
6.1.1 Etapas de síntesis del ARN.
6.2 Organismos eucarióticos:
6.2.1 Etapas de síntesis del ARN.
6.2.2 Modificaciones postranscripcionales del RNA mensajero

INTRODUCCIÓN

TRANSCRIPCIÓN GENETICA:La transcripción del ADN es el primer proceso de la expresión génica, mediante el cuál se transfiere la información contenida en la secuencia del ADN hacia la secuencia de proteína utilizando diversos ARN como intermediarios. Durante la transcripción genética, las secuencias de ADN son copiadas a ARN mediante una enzima llamada ARN polimerasa que sintetiza un ARN mensajero que mantiene la información de la secuencia del ADN. De esta manera, la transcripción del ADN también podría llamarse síntesis del ARN mensajero. En el caso de las eucariotas, el proceso se realiza en el núcleo, y es similar al de las procariotas, pero de mayor complejidad. Diferentes ARNp transcriben distintos tipos de genes. La ARNpII transcribe los pre-ARNm, mientras que la ARNpI y ARNpIII transcriben los ARN-ribosomales y ARNt, respectivamente. Los ARNs transcritos son modificados posteriormente. El pre-ARNm,por ejemplo, sufre un proceso de maduración que tras cortes y empalmes sucesivos elimina ciertos segmentos del ADN llamados los intrones para producir el ARNm final. Durante este proceso de maduración se puede dar lugar a diferentes moléculas de ARN, en función de diversos reguladores. Así pues, un mismo gen o secuencia de ADN, puede dar lugar a diferentes moléculas de ARNm y por tanto, producir diferentes proteínas. Otro factor de regulación propio de las células eucariotas son los conocidos potenciadores (en inglés: "enhancers"), que incrementan mucho (100 veces) la actividad de transcripción de un gen, y no depende de la ubicación de éstos en el gen, ni la dirección de la lectura. Para la transcripción generalmente ocurren tres etapas que son; iniciación, elongación y terminación.


OBJETIVOS

  • ·         Conocer los eventos de síntesis del ARN como molécula precursora de la síntesis proteica y su importancia en el funcionamiento de los seres vivos.



METODOLOGÍA

La metodología que utilizare o los pasos a seguir para la publicación y desarrollo de los diferentes subtemas de esta unidad serán: haciendo un resumen al final de la unidad de todos los subtemas, publicando lo más importante y con toda claridad, de cada tema visto en clase. Además los trabajos que se hagan  en clase se publicaran en ese mismo día y las evaluaciones (exámenes) se publicaran al  final de la unidad, así como las tareas que deje el profesor en la fecha que indique y como las indique.


BIBLIOGRAFIA


miércoles, 25 de abril de 2012

ENSAYO



IMPORTANCIA DE LAS MUTACIONES EN EL ESTUDIO DE LA BIOLOGÍA



Para poder saber por qué son importantes las mutaciones en el estudio de la biología, primero se necesita saber que son las mutaciones y que consecuencias provoca, y se dice que la mutación en genética y biología, es una alteración o cambio en la información genética (genotipo) de un ser vivo, es decir, es la alteracion en la secuencia del adn y que, por lo tanto, va a producir un cambio de características, que se presentan ya sea de forma natural o inducidas y que se puede transmitir o heredar a la descendencia. Y estas mutaciones dependiendo en que tiempo se lleven a cabo pueden ser beneficiosas si son de largo plazo y perjudícales cuando se lleva acabo a corto plazo para la mayoría de los seres vivos. Por eso el estudio de las mutaciones son importantes en la biología porque gracias a ellas es posible que existan tanta variedad de especies y que la vida siga evolucionando, y más porque gracias a esas mutaciones que han sufrido muchos organismos han logrado sobrevivir y adaptarse a diferentes medios y esas características que van adquiriendo con el tiempo se las logran transmitir a sus descendientes que van a hacer mejores que sus progenitores. Las mutaciones son muy importantes en el proceso evolutivo ya que ellas son la materia prima para cambiar la estructura de un individuo, el cual transfiere esas características a sus descendientes como lo dice Mendel. Esto lo apoyamos con la necesidad de adaptarnos que postula Darwin en su teoría de la selección natural y que nos dice bien claro que los organismos mas fuertes son los que sobreviven y que los mas débiles son los que desaparecen. además también las mutaciones son importantes porque gracias a su estudio que se ha hecho y se sigue haciendo se han ido encontrando las causas de muchas enfermedades que son transmitidas de padres a hijos y también las enfermedades que se van adquiriendo por trabajar en lugares donde uno se encuentra expuesto a muchos productos químicos o están expuestos a tecnología irradiante y por lo mismo sufren cambios en su cuerpo y por eso existen muchos humanos con deformaciones. estos cambios que ocurren tambien son por que existen genes que se encuentran ahi en el organismo y presentan mutaciones pero son recesivos, es decir, no se expresan con tanta facilidad solo cuando encuentran el medio para hacerlo y es cuando aparecen diferentes cambios en la estructura de un ser y dependiendo de que organismo se trate puede ser beneficioso o perjudicial. 
y con el estudio de esas mutaciones que se requiere de tiempo y dedicación se han podido encontrar cual es la causa de esa mutación y como se puede evitar o controlar. ejemplos claros de mutaciones beneficiosas los encontramos principalmente en las plantas ya que las mutaciones que estas presentan no son tan perjudiciales como para un humano, algunas mutaciones que surgieron en algunas plantas fue de manera natural como es el caso del naranja sin semilla que se encontró en brasil en un huerto en un árbol que tenia en una rama diferentes frutos del resto del árbol, los frutos de esa rama tenían limones sin semilla y el resto si tenían semilla este cambio se debió a una mutación natural y en celulas somáticas, y solo se puede reproducir por estacado (reproducción asexual) y no por semilla por obvias razones, este acontecimiento fue motivo para que numerosos investigadores se dieran a la tarea de encontrar la causa de ese cambio y así pudieron determinar que fue lo que le paso a esa planta. otro ejemplo pero ahora de mutaciones inducidas las podemos encontrar bien claras en plantas que el ser humano necesita para poder subsistir y son la base de su alimentación, estas plantas como la cebada, el jitomate, el trigo,el maíz entre otras,el humano las a sometido a diferentes tipos de radiaciones para que le ayuden a mutar, esto para que cuando siembre esas semillas y las que se logren desarrollar tengas características mejores que sus progenitores, es decir, que sean mas resistentes a ciertas enfermedades y por supuesto que tengan mayor producción y calidad y por eso el ser humano utiliza las mutaciones inducidas para su beneficio y también lo puede hacer con otros organismos como en los hongos.si una mutación ocurre en las células germinales estas mutaciones si pueden ser transmitidas de padres a hijos y en células somáticas no se heredan esas  mutaciones si son adquiridas. por eso estas mutaciones son mas perjudiciales y mortales en algunos casos como en los humanos. y estas mutaciones que se han ido dando a lo largo del tiempo son las beneficiosas y las que les permiten a muchos organismo a adaptarse a diferentes medios para su supervivencia.
Como conclusión si las mutaciones son alteraciones en la secuencia del ADN y la biología se encarga del estudio de la vida, entonces el estudio de las mutaciones en la biología son todas las modificaciones que han sufrido los organismos a lo largo de su vida y que les han permitido sobrevivir hasta el día de hoy y esas alteraciones son como consecuencia beneficiosas. Y sin las mutaciones no fuera posible la evolución y como consecuencia no habría gran diversidad de formas de vida.





martes, 24 de abril de 2012

CONCLUSIONES



En esta unidad se aprendió cosas muy importantes, que uno como biólogo necesita saber y entender, como se lleva acabo la reparación de los diferentes daños que puede llegar a sufrir el ADN, que es lo que lo provoca y que daños son los que se pueden observar físicamente y cuales están ocultos pero con el riesgo de salir en cualquier momento. En mi persona esta unidad me ayudo mas en mi formación como biólogo y mas por que aprendí como es que puede llegar a sufrir daños la estructura del ADN cuando se esta replicando, pero también que esos daños pueden ser en su gran mayoría provocados por agentes químicos y por exposición a diferentes medios que pueden estar contaminados y que nos pueden perjudicar para nuestro desarrollo celular. En esta unidad también aprendí que los cambios que alteran la secuencia del ADN se llama mutación y que existen diferentes tipos, dependiendo a que estructura esta dañada o  dañe, puede haber mutaciones somáticas y germinales, estas últimas pueden ser perjudiciales para el ser humano y son heredados. También hay mutaciones génicas, cuando alteran los genes, mutaciones cromosómicas cuando se dañan los cromosomas o partes de los cromosomas y mutaciones genómicas, cuando se daña todo el genoma o se altera, pudiendo alterar solo un juego de cromosomas o solo un cromosoma pero ya se daña el cariotipo por completo y se produce las mutaciones. Estas también pueden ser producidas por agentes físicos como las radiaciones o por agentes químicos, como diferentes sustancias entre ellas el gas mostaza, entre otros. Ya tenía conocimiento de que era una mutación y que consecuencias provoca y como se encuentra dividido, pero aprendí cosas que no sabia y que me pueden ayudar mas para mi formación. Entre una de esas cosas que aprendí fue que el ADN sufre alteraciones cuando se replica y que eso provoca que se produzcan las mutaciones pudiendo ser recesivas ósea que estén presentes o escondidas y que en cualquier momento se puedan ser legibles y las que se pueden observar fácilmente por que son características fenotípicas. Además las mutaciones han ayudado para la evolución de la vida, por que se dice que las mutaciones a largo plazo son beneficiosas pero las de corto plazo son mortales para muchos organismos, las plantas son las que resultan mas beneficiadas por estas mutaciones por que van adquiriendo mas características que les permiten sobrevivir y no son tan perjudiciales como para al ser humano.


BIBLIOGRAFIA